特殊分子诊断
循环肿瘤DNA(ctDNA)检测(超灵敏微滴数字PCR)

血浆游离循环肿瘤DNA(Cell-free Circulating Tumor DNA,ctDNA)是由肿瘤细胞释放到血浆中的单链 或者双链DNA,携带有与原发肿瘤组织相一致的分子遗传学改变。

ctDNA来源

含量低,约占整个循环DNA的1%,甚至只有0.01%

ctDNA液体活检的意义
指导患者个体化用药
通过ctDNA检测分析是否有新的突变位点,对肿瘤病人的治疗效果进行实时监控(尤其在追踪肿瘤转归、转移和复发等方面)分析耐药性产生的原因,提高治 疗效果,节省治疗成本,协助医生调整治疗方案。
01肿瘤的异质性研究
02肿瘤复发转移风险评估
03靶向药物的个性化指导
04动态监测肿瘤发生发展及疗效
肿瘤早期诊断筛查
针对相关肿瘤进行早期瘤指标筛查,为大众健康保驾护航,远离肿瘤君。
ctDNA的检测难点

随着液体活检技术的飞速发展,利用ctDNA检测肿瘤相关分子标志物尤其适用于较难通过手术或穿刺获得肿瘤组织样本的患者,具有显著优势。然而,血液 中的ctDNA含量极低,尤其是一些低频突变,不易被检测到。在仅存有少量突变存在的情况下,如何准确检测出突变/低频变异,对个性化医疗的发展是一个 巨大的挑战,急需一个高灵敏度的检测平台。

ddPCR检测平台/实现痕量核酸高灵敏检测

微滴式数字PCR ( ddPCR "")技术是Bio-Rad独特的数字РPCR技术,该技术将一个标准PCR反应分配到大量微滴中,在每个微滴中包含或不包含一个或多个 拷贝的目标分子(DNA模板),实现“单分子模板PCR扩增”,扩增结束后,通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。

采用的先进微流体技术QX200系统可将每份样品生成20,000个高度均一的纳升级微滴。并且还可通过反应孔合并对高达数以百万计的微滴进行分析,实现 单份样品更高的检测灵敏度,使定量分析达到一个全新的水准。

灵敏度高
ddPCR将一个传统的PCR反应变成了数万个独立的PCR反应,灵敏度高达0.1%~0.001%特别适合稀有突变的检测。
绝对定量
ddPCR无需依赖于标准曲线,直接计算目的序列的拷贝数,可以进行精确的绝对定量。
稳定性高
ddPCR的定量方法不依赖扩增曲线的循环阈值,不受扩增效率的影响,对背景序列和抑制物的耐受能力较高,具有很好的准确度和重现性。
技术优势
无创、无损、实时、多次∶轻松获取样本,快速获得检测结果
相较于传统Real-Time PCR、ARMS方法以及新一代测序 技术,ddPCR技术检测 灵敏度高,准确度高,假阳性率低, 可用于肿瘤的早期诊断和动态监测
捷易自主研发检测位点

捷易生物通过不断自主研发与优化,可高效、精准地针对血液中ctDNA或组织DNA样本中的K-Ras、N-Ras、MET、HER2、EGFR、 C-Kit、TP53等多个肿瘤 驱动基因热点突变及常见耐药复发突变进行定性及定量检测。

单个基因位点检测
1
多个基因位点检测
2
CNV检测
3
检测流程
检测前咨询
Consultation before testing
01
标本采集
Specimen collection
02
实验检测
Experimental detection
03
出具报告
issue a report
04
捷易检测报告示例
                       
捷易生物实际检测案例分享
案例:结直肠癌病人抗EGFR治疗过程中血浆耐药突变动态监测
某结直肠癌病人在接受西妥昔单抗药物治疗一段时间后出现疾病进展(PD,progressive disease ) ,怀疑出现了耐药突变,随后采用ddPCR方法检测病人疾病 进展时期血浆,对靶向药物已知突变位点进行筛选,筛选得到EGFR-p.R451C突变为阳性(图1)﹔随后对病人其它时期血浆样本用ddPCR方法进行了 EGFR-p.R451C位点的动态监测(图2),寻找耐药位点与疾病进展之间的关联。
检测结果
结直肠癌病人用药之后,检出了EGFR-p.R451C位点突变,用于后期动态监测︰随着疾病的进展,该位点的突变比例逐渐升高;后期临床治疗以后,效果明显,该位点突变比例下降;一段时间监测,发现疾病又进展,用药后检出突变;开始对病人进行更换用药,突变比例下降明显。
检测意义
利用ddPCR检测平台对患者不同时期血浆提取的cfDNA进行检测,可以对特异突变进行灵敏、准确的检测和追踪,提前揭示疾病进展.